牛血清白蛋白（BSA）制备技术简介

牛血清白蛋白（BSA），是牛中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为 66.446kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，如在免疫分析实验中作为封闭剂和作为抗体保护剂。

BSA的制备方法主要有以下几类：

1、冷乙醇方法

1940年由哈佛大学的Cohn的发明的，多步蒸馏法，血清蛋白可以根据控制不同的温度和不同的乙醇浓度进行分离。他利用两这种不同来把血清分离成五种组分，第五部分含有最多的白蛋白，所以叫做第五组分。冷乙醇法由于加入了有机溶剂，需要在温度极低的情况下在血液中加入乙醇直到白蛋白析出，会有残留溶剂造成BSA 纯度不高。现代工艺对Cohn冷乙醇法进行了不断的改进。

2、热休克法

heat-shock热激包含控制温度和过滤来分离白蛋白。现在倾向于在几个关键步骤用热代替有机溶剂，因为乙醇有易挥发和危险性。热休克法生产的BSA产量高，纯度也高，逐渐取代Cohn法成为BSA分馏主要方法，但是热休克法BSA也有一些缺陷：BSA蛋白高温变性，活性低。

3、色谱层析法（Chromatographic）法
色谱层析法是目前BSA生产的先进方法，也是温和的方法；主要包括三个步骤，超滤，离子交换色谱层析和硫酸铵沉淀；整个过程，无加热，无乙醇，无辛酸，保护BSA自然结构和功能，纯度高，适合细胞培养。但与其他方法比成本较高。